细胞离心速度和时间的选择
离心收集细胞时建议尽量选择较小的离心力,已避免细胞受损。由于各实验室离心机转子直径不一,实际转速会有差异,一般都是在900-1200rpm(180-240g)之间。
细胞悬液体积越大,需要的离心转速和离心时间也就越大。1m及以下的建议离心1min,900rpm;1-15mL建议离心3min,1000rpm;15-50mL建议离心5min,1200rpm。
具体离心转速及时间以实际离心后上清无明显细胞颗粒为准,如果离心后发现上清有细胞颗粒,可以适当转速或者延长离心时间。
当细胞碎片较多的时候,可以用15mL离心管,选择800-900rpm低速离心以去除碎片。注意低速离心会损失部分细胞,细胞密度低时不要使用低速离心法去除碎片。
需要注意的是,上述步骤提供了一般性的指导,具体的离心条件可能因实验要求、细胞类型和实验室设备而有所不同,需根据实际情况调整。
细胞离心速度和时间的选择 – 云贺生物
低速离心还有一个好处是防止细菌污染,细菌很难被低转速离心,可以在换液中被丢弃。当发现细胞已经被细菌污染时,也通常采用低速离心用PBS多次清洗稀释细菌密度。