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说明书备忘

这篇笔记整理了实验室常用的几款试剂盒与

2x m5 hiper plus taq hifi pcr mix


2 × Phanta Flash Master Mix (Dye Plus)

2 × Phanta Max Master Mix (Dye Plus)

质粒小提中量试剂盒

Protocol

P1112-03

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胶回收试剂盒(诺唯赞DC301-01)

Protocol

DC301-01

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提基因组试剂盒(诺唯赞DC102-01)

Protocol

DC102-01

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TRIzol Reagent提RNA

注意,细胞加了TRIzol之后立刻、立刻、立刻吹打混匀!而且是加一个tube立马吹打散开再加下一个tube,如果先用一个枪头加完之后,再逐个吹散,这时候就可能会像臭抹布一样吹不散了。极大浪费时间。

Protocol

TRIzol_RNA

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纯文字版

TRIzol Reagent User Guide (Pub.No. MAN0001271 C.0) (thermofisher.cn)

1)收集1个12-well plate孔里的细胞,离心弃上清,加300μL TRIzol Reagent,室温下吹打混匀。(此处可冻在-20℃暂存);

2)室温孵育5min,完全裂解细胞;

3)加60μL氯仿(三氯甲烷),盖上盖子剧烈震荡混匀,室温放3min;

4)4℃,12000rpm离心15min;离心后液体分上中下三层;

5)将上层无色水相转移到新的1.5mL EP管(约170μL,EP管里可以视RNA量多少提前加1μL RNase-Free glycogen),旧管丢掉;

6)加150μL异丙醇,4℃孵育10min;

7)4℃,12000xg离心10min;

8)弃上清,用300μL 75%乙醇洗,4℃,7500xg离心5min;

9)弃上清,在12000rpm瞬时离心,用小枪头吸干剩余液体;

10)Air dry 5-10min,用20-30μL RNase-Free H2O洗脱;55℃金属浴10min加速溶解;

11)NanoDrop定量。


rRNA depletion Module(RK20378) with stranded mRNA-seq Lib Prep (RK20349)

Protocol

stranded mRNA-seq Lib Prep for Illumina

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