https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32494599
文章大意
这篇文章发现核内肌动蛋白（nuclear actin）在诱导性转录中通过促进RNA聚合酶II（Pol II）聚集来调节基因表达，具体机制涉及N-WASP和Arp2/3复合体介导的actin聚合，并在血清和IFN-γ刺激下均表现出增强Pol II聚集和转录活性的作用，揭示了nuclear actin在细胞快速响应环境变化中的关键功能。
主要结果
通过RNA测序分析发现，破坏nuclear actin显著降低了血清响应基因的表达
Fig. 1. Nuclear actin is required for the establishment of the serum-inducedtranscriptional program. (A) Heatmap showing the fold change for differentiallyexpressed genes upon serum stimulation in cells overexpressing G13R and cellsoverexpressing GFP. (B) Venn diagrams showing the numbers of differentially ex-pressed genes. (C) qRT-PCR conformation for nine canonical serum-response genesand two housekeeping genes. (D) The functional annotations of the top-rankedgenes after sorting by the level of transcriptional change caused by actin mutantoverexpression.
使用ImmunoFISH和超分辨率成像技术观察，发现血清刺激下Pol II在血清响应基因处形成聚集区
使用PALM和STORM成像技术研究，发现核内actin聚合对于血清刺激下Pol II聚集的形成至关重要
使用CRISPR-Cas9敲除N-WASP和Arp2/3抑制剂处理细胞，发现N-WASP和Arp2/3对于血清诱导的Pol II聚集至关重要
CA是N-WASP的dominant-negative mutant
使用optoDroplet系统观察，发现血清刺激下N-WASP与Pol II和核内actin共定位形成相分离结构
用IFN-γ处理细胞，发现核内actin在IFN-γ刺激下也能增强Pol II聚集，表明其在各种环境刺激下的广泛作用
我的课题能用到的信息
特异性干扰nuclear actins的方法
- 核定位信号（NLS）融合突变体：研究人员将不能聚合的肌动蛋白突变体G13R与核定位信号（NLS）序列融合，过表达该重组蛋白NLS-actin G13R，以特异性地破坏核内肌动蛋白的聚合状态。
- 出口蛋白6（XPO6）过表达：通过过表达出口蛋白6（XPO6），该蛋白特异性地将肌动蛋白-Profilin复合物输出到细胞质中，从而降低核内肌动蛋白水平。
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